Как проводится ВПЧ-тест

Как известно, ВПЧ инфицированы большинство половозрелых сексуально активных людей (более 70%). Клиническая картина болезни характеризуется поражением эпителиальной ткани – кожи, слизистых оболочек. До появления клинических признаков – папиллом/папилломатоза, кондилом, бородавок, обнаружить присутствие в организме вируса стандартными методами диагностики невозможно – он долгое время может никак не проявлять себя. Но ПЦР на ВПЧ как тест используется не только для подтверждения присутствия вируса, но и для установления его принадлежности к определенному типу (их найдено более 100). Это важно для определения вероятности озлокачествления папиллом и кондилом, так как вирус имеет 3 группы онкогенности: малого риска – 6, 11 типы; среднего – 31, 33, 35 типы; высокого – 16, 18 типы. 

Показания к применению

Необходимость в проведении диагностики путем ПЦР на ВПЧ возникает в случаях:

• Контакта с людьми, которые уже имеют положительную реакцию ПЦР на вирус папилломы человека – незащищенный половой акт, самостоятельные роды инфицированной мамы (возможно заражение ребенка), использование общих предметов личной гигиены (полотенца, мочалки), тесный кожный контакт.
• Наличия таких образований, как папилломы/кондиломы на половых органах – на ПЦР пациента направляет гинеколог/уролог, с целью диагностировать папилломавирусную инфекцию, то есть, обнаружить ВПЧ, определить его онкогенность.
• Скрининговые исследования с целью раннего выявления.

Плюсы и минусы анализа

ПЦР-диагностика ВПЧ часто используется гинекологами, урологами, дерматовенерологами. Что же это такое – ПЦР-исследование?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – увеличение количества определенных участков ДНК в биологическом материале для их идентификации, применяется в диагностике инфекционных, генетических болезней, обследования на скрытые инфекции, определения родства. 

Плюсы:

• Высокий уровень специфичности.
• Высокая скорость выполнения, так как процесс автоматизирован – результаты не нужно ждать неделями.
• Один образец биоматериала можно использовать для диагностики нескольких заболеваний – достоверность анализа остается высокой.
• Высокий уровень чувствительности – обнаружение возбудителя инфекции даже при низкой концентрации в материале, что помогает начать проведение специфической профилактики.

Минусы:

• Риск ложноположительного результата – анализ сдан несвоевременно, например, материал взят сразу после лечения, когда инфекция ликвидирована, но погибшие клетки еще остались. Метод ПЦР не отличает мертвые клетки от живых.
• Риск ложноотрицательного результата – причиной являются нарушения технологического процесса:
• Неправильное хранение и транспортировка биоматериала.
• Несоблюдение правил сохранения стерильности проб.
• Просроченные/некачественные реагенты.

Виды анализа

Существует 4 вида анализа на папилломавирус методом ПЦР. Выбор методики осуществляет лечащий врач.

Методы проведения исследования:

• Качественный – данный способ проведения ПЦР выявляет ВПЧ, определения штамма вируса не происходит.
• Генотипирование – более глубокий анализ на ВПЧ, то есть, идентификация штамма.
• Комбинированный – метод, включающий в себя полимеразную цепную реакцию, имеющий узкую направленность – нацелен на поиск 16 штамма.
• Количественный – определяет число вирусных тел.

Генотипирование папилломавирусов

Генотипирование папилломавирусов проводят для прогнозирования динамики болезни. Целью типирования ВПЧ является не только найти вирус – важно идентифицировать штамм. Если найдено несколько штаммов – прогноз считают неблагоприятным, высока вероятность персистенции инфекции. Применяется для мониторинга эффективности противовирусной терапии. Также можно определить, является ли положительный результат качественного анализа следствием остатка ДНК возбудителя после проведенного лечения либо нового заражения (выявится новый тип, отличный от того, который определялся перед началом лечения). Результат формулируется как и в качественном методе.

Качественный способ

Определение наличия ВПЧ без установления принадлежности к какому-либо штамму, имеет значение при первичной диагностике. Результаты формулируются как “обнаружен”/”не обнаружен”.

Количественное определение и комбинированный метод

Количественный анализ – подсчет содержания вирусных тел в биологическом материале (число вирусов на 100 000 клеток). Данный вид тестирования применяется для установления тяжести процесса, назначения терапии. Суть – определение количества ВПЧ в 100 тыс. клеточных единиц биоматериала (соскоба). Меньше 3 – содержание вируса низкое, больше 5 – высокое (повышена вероятность озлокачествления).

Комбинированный метод (сочетает в себе качественный и количественный) – целенаправленный поиск 16 штамма, являющегося высокоонкогенным. Используется в ситуациях, когда врач подозревает наличие вируса высокой степени риска. Итог исследования имеет формулировки “не обнаружен”, “обнаружен штамм 16”, “обнаружен ВПЧ, в том числе штамм 16”.

ВКР-скрининг – что это такое и как проводится

ВКР-скрининг — массовая плановая диагностика на папилломавирус с целью раннего выявления. В исследовании на ВПЧ ВКР у женщин участвуют лица старше 25 лет (по некоторым данным – с 21 года/спустя 3 года после начала половой жизни; при сильной сексуальной активности, большом количестве партнеров – с 18 лет). Рекомендуется проходить 1 раз в 3 года в ходе диспансеризации. В процессе мероприятия выявляются вирусы высокого риска, представляющие опасность тем, что могут вызывать развитие рака шейки матки. Определение концентрации ДНК при ВПЧ высокого онкогенного риска проводится методом ПЦР.

Этапы скрининга:

• Мазок на цитологию по Папаниколау (ПАП-тест). Для проведения теста берут материал из канала шейки матки (зоны трансформации – места перехода цилиндрического эпителия в многослойный плоский) в ходе осмотра, который наносят на стекло/в емкость со специальной жидкостью (тогда забор мазка производят щеточкой). Затем материал после окрашивания изучают под микроскопом на наличие атипичных клеток, если они есть – тест положительный. Метод также называют цитологическим.
• ПЦР – определение наличия вируса. Реакцию проводят тем, у кого получен положительный результат ПАП-теста. Для исследования можно применять материал мазка, кровь, мочу.
• Расширенный скрининг – определение типа и количества ВПЧ высокого риска онкогенности (Дайджин-тест – число вирусных тел на 100тыс. клеток: до 3 – концентрация малая, 3-5 – средняя, больше 5 – высокая).

Забор материала осуществляют как для ПАП-теста.

Правила подготовки к сдаче

• За 2 дня до проведения нужно воздержаться от секса, приема любых медикаментов, спринцевания, вагинальных свечей, таблеток.
• Мазок на ПЦР сдают в первую фазу цикла, после менструации.
• В период обострения хронических инфекционных патологий, после приема антибиотиков забор материала не проводится.

Правила сдачи крови/мочи:

• Кровь – сдается из вены утром натощак, за несколько дней до анализа из рациона исключают аллергены (шоколад, цитрусовые и т.д.).
• Моча – для анализа ПЦР на ВПЧ нужно сдать натощак утреннюю мочу (последний прием пищи – 8 часов назад) в стерильный контейнер. Доставить контейнер в лабораторию нужно в течение 4 часов после забора материала.

Как сдавать мужчинам и женщинам

Для исследования возможно использование практически любого человеческого биоматериала – крови, мочи, мазка, соскоба. Правила сдачи крови и мочи у мужчин и женщин не отличаются.

Отличается методика взятия мазка:

• Как сдавать анализ женщине – соскоб делается щеточкой, круговым поступательным движением из мочеиспускательного канала/ влагалища/цервикального канала.
• Мужчине – соскоб щеточкой делают с головки члена, мочеиспускательного канала.

Перед забором мазка нужно обеспечить соблюдение правил личной гигиены.

Расшифровка результатов

Трактовка полученных результатов проводится в зависимости от использованного метода:

• Качественный – наличие/отсутствие – “обнаружен”/”не обнаружен”.
• Генотипирование – обнаружение какого-либо конкретного штамма – “обнаружен”/”не обнаружен”.
• Комбинированный – обнаружение 16 штамма – “не обнаружен”, “обнаружен штамм 16”, “обнаружен ВПЧ, в том числе штамм 16”.
• Количественный:

Подсчет количества вирусных тел на 100 тыс. клеток биоматериала (соскоба):

• <3 – содержание низкое (вероятность рака низкая)
• 3-5 – средняя
• >5 – высокая (высокая вероятность рака)

Методы лечения

• Хирургический – удаление папиллом, кондилом, бородавок:
• Лазером (лазерная деструкция/коагуляция).
• Радиоволновым излучением.
• Электроножом.
• Прижигание бородавок жидким азотом (криодеструкция).
• Применение средств, действующих локально, для некротизации патологических элементов – веррукацид, суперчистотел, подофиллотоксин 0,5%. После проведения хирургического лечения назначают противовирусные, иммуномодулирующие препараты.
• Противовирусные препараты – Изопринозин, Виферон, Панавир, Генферон, Кипферон.
• Укрепление иммунитета – Иммунал, Полиоксидоний, Галавит.

Противовирусные и иммуностимуляторы выпускаются в форме таблеток, свечей. Длительность курса определяется лечащим врачом, как правило, 10-14 дней, по необходимости продляется.

При изъязвлении/воспалении образований проводят противовоспалительное лечение – обработка антисептиками (например, хлоргексидином, мирамистином), антибиотиками, противовирусными мазями. Сильно воспаленную папиллому лучше удалить хирургически.

Возможно использование народных методов лечения после консультации с лечащим врачом. Народные методы лечения имеют 2 направления:

1. Удаление образований. Наружно используется настойка чистотела, сок одуванчика/сырого картофеля – смазывать дважды в сутки. Папиллома отпадает примерно через 1,5-2 месяца.
2. Укрепление иммунной системы – можно проводить на протяжении всего заболевания. Рекомендуют:

• Отвары – еловой хвои/лука репчатого с добавлением меда.
• Чаи – шиповник, мелисса, иван-чай, мята, липовый цвет, кориандр.
• Сухофрукты – смесь из грецких орехов, сушеных абрикосов, изюма, лимона с медом.

Видео

Анализ ПЦР на ВПЧ.